Jenis-jenis pewarnaan –selamat datang diblog bagugus.blogspot.com. pada kesempatan kali ini saya akan memberi pengetahuan tambahan untuk kita sekalian yaitu jenis-jenis pewarnaan bakteri . ktia tahu bahwa bakteri termasuk mikroorganisme (virus,protozoa,dll) berukuran mikroskopis yang mana hanya dapat dilihat menggunakan mikroskop. Selain itu bakteri tidak dapat dilihat dengan jelas morfologi nya tanpa ada interaksi dengan zat warna. Zat warna ini lah yang membantu melihat struktur bakteri .pada pewarnaan bakteri dibagi menjadi empat berdasarkan fungsinya yaitu : pewarnaan sederhana, pewarnaan gram, pewarnaan negative ,dan pewarnaan spora.
Kali ini bagugus.blogspot.com akan membagikan prosedur kerja pewarnaan,dan tujuan dari masing-masing pewarnaan .
§ Pewarnaan sederhana
Tujuan : untuk mempertinggi kontras antara sel sekelilingnya dan mengamati cirri-ciri tertentu mikroba.
Langkah kerja :
1. Bersihkan objek gelas dengan alcohol sehinggga bebas dari lemak ,lalu lewatkan beberapa kali diatas nyala api.
2. Teteskan air pada gelas objek.
3. Secara aseptis pindahkan satu mata ose mikroba yang akan diperiksa sebarkan sehingga membentuk lapisan yang tipis.
4. Biarkan preparat tersebut mongering
5. Fiksasi dengan melewati satu kali diatas nyala api
6. Teteskan zat warna crystal violet pada bagian yang akan diwarnai selama satu menit
7. Cuci dengan air mengalir pelan-pelan sampai sisa zat warna tercuci seluruhnya
8. Kering anginkan preparat tersebut
9. Periksa dibawah mikroskop dan menggunakan minyak emersi
10. Setelah pengamatan bersihkan lensa objek dengan xylol.
§ Pewarnaan Negatif
Tujuan :untuk mengamati morfologi organisme yang sukar diwarnai dengan pewarna-pewarna sederhana.
Langkah kerja :
1. dingin teteskan dengan larutan nigrosin pada gelas objek
2. Secara aseptis pindahkan satu mata ose mikroba yang akan diperiksa
3. Campuran suspense mikroba dengan larutan nigrosin ini diratakan dengan gelas sehingga diperoleh permukaan yang luas dan tipis
4. Biarkan preparat tersebut mongering
5. Amati preparat dibawah mikroskop . sel yang akan tampak transparan dengan latar belakang gelap
6. Setelah mengamati bersihkan lensa dengan xclol.
§ Pewarnaa spora
Tujuan : untuk melihat spora bakteri.
Langkah kerja :
1. Bersihkan objek glas dengan alcohol,lalu lewatkan beberapa kali diatas nyala api
2. Teteskan suspense mikroba ,buat lapisan tipis dan merata
3. Kering anginkan ,setelah itu fiksasi diatas nyala lampu
4. Teteskan larutan Malachit green dan biarkan sampai meguap selama 0.5
5. Cat atau pewarna yang berlebihan cuci dengan air yang mengalir dankering anginkan.
6. Tambahkan larutan safranin selama 30 detik
7. Cuci dengan air mengalir dan kering anginkan
8. Amati dibawah mikroskop
Keterangan : spora yang terlepas tampak hijau ,sedangkan spora yang terdapat di dalam sel kelihatan transparan ,sedangkan sel vegetati bewarna merah
§ Pewarnaan gram
Tujuan : Untuk mempelajari bentuk-bentuk bakteri melalui pengecatan gram
Langkah kerja :
1. Membersihkan kaca objek dan kaca penutup dengan alkohol, melewatkan di atas bunsen atau lampu spiritus beberapa kali.
2. Secara aseptis mengambil 1 lup biakan padat Acetobacter xylinum dan S. Aureus, meletakkan di atas kaca objek, meratakan seluas ± 2 cm, mengering anginkan.
3. Memfiksasi di atas nyala lampu spiritus beberapa kali, sehingga sel-sel bakteri mati.
4. Meneteskan 2-3 tetes larutan Gram A pada preparat dan mendiamkan selama 1 menit.
5. Mencuci dengan air mengalir sampai cat tercuci semua, mengering anginkan.
6. Meneteskan 2-3 tetes larutan Gram B dan mendiamkan selama 1 menit. Mencuci dengan air mengalir sampai cat tercuci semua, mengering anginkan.
7. Melunturkan dengan larutan Gram C sampai lapisan tampak pucat (± 30 menit), dan langsung mencuci dengan air mengalir lalu mengering anginkan.
8. Meneteskan cat penutup (Gram D) dan membiarkan selama 2 menit. Mencuci dengan air mengalir dan mengering anginkan.
9. Mengeringkan bagian bawah kaca objek dengan tissu, mengamati di bawah mikroskop mulai dari perbesaran lemah, sedang dan kuat.
10. Setelah mengamati bersihkan lensa dengan xclol.
Demikianlah postingan saya kali ini semoga dapat beramnfaat untuk kita semua ,mohon maaf atas kekurangan ,Terima kasih
